北京张博士医考公卫执业医师辅导资料— 副伤寒分子生物学诊断方法
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副伤寒分子生物学诊断方法:
1.DNA 探针(DNAProbe)DNA 探针是用DNA 制备的诊断试剂,用于检测或鉴
定特定的细菌,方法是用一段已标记的特定的DNA 片段(探针)与标本中已变性
的细菌DNA 杂交,通过测定是否发生杂交反应来达到检测目的,由于此探针是以
细菌专有的特异性基因片断制备,故特异性很高。用DNA 探针对培养所得的伤寒
杆菌进行检测,敏感性需标本中达1000个细菌才能检出。DNAProbe的特异性高而
敏感性低,一般用于菌种鉴定及分离。
2.聚合酶链反应(PCR )PCR 方法是80年代中后期发展起来的一种分子生物
学方法,它能在数小时内在体外将目标基因或DNA 片段扩增到数百万倍,检出率
较DNA 探针高100 ~10000 倍,JaeHS 等用PCR 方法扩增伤寒的鞭毛抗原编码基
因,敏感度能检出10个伤寒菌,特异性为100%,PCR 方法因其高度敏感,易出现
产物污染,所以控制PCR 方法的假阳性及假阴性,是提高准确度的关键。国家医
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