造血细胞的采集

造血细胞的采集

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(一)骨髓骨髓采集已是常规成熟的技术。按患者体重,(2~4)×108/kg单个核细胞(MNC)数为一般采集目标值。为维持供髓者血流动力学稳定、确保其安全,一般在抽髓日前14天预先保存供者自身血,在手术中回输。少数情况下供者需输异基因血液时,则须将血液辐照25~30Gy,灭活淋巴细胞后输注。供受者红细胞血型主要不合(如A→O)时,为防急性溶血反应,需先去除骨髓血中的红细胞。对自体BMT,采集的骨髓血需加入冷冻保护剂,液氮保存或-80°C深低温冰箱保存,待移植时复温后迅速回输。
(二)外周血在通常情况下,外周血液中的HC很少。采集前需用G-CSF动员(mobilization),使血中CD34+HC升高。Allo-PBSCT的同胞供体应是健康人,需检查除外感染性、慢性系统性疾病等不适于捐献情况并签署知情同意书。予以G-CSF(非格司亭,惠尔血),5μg/(kg.d),分1~2次,皮下注射4天,在第5天开始用血细胞分离机采集外周血干细胞,一般连续采集2天,每次采集前2小时肌内注射G-CSF 5μg/kg.Auto-PBSCT的供者是患者,可予化疗(CTX,VP16等)进一步清除病灶并促使干细胞增殖,当白细胞开始恢复时,按前述健康供体的方法动员采集造血干细胞。自体外周造血干细胞的保存方法同骨髓。
无血缘供体动员采集过程需住院约7天。第一天体检,应该对供体发生并发症的可能因素进行仔细评估,全面告知。供体应在没有任何压力下签署知情同意书。此后几天按上述健康供体的方法动员和采集外周造血干细胞。无血缘造血细胞捐献过程安全,无严重的不良事件报告。不会降低供者的抵抗力,不影响供体健康。采集干细胞的管道不重复使用,不会传播疾病。输给患者的造血干细胞数量是成功植活的保证,采集CD34+细胞至少2×106/kg(供者体重),MNC至少5×108/kg(供者体重)以保证快速而稳定的造血重建。MNC是一个综合的血细胞数量的标志,包含CD34+和CD34-造血干细胞,间质干细胞,淋巴细胞和单核细胞等。
(三)脐带血脐血中的HC和免疫细胞均相对不成熟,CBT后GVHD相对少。因细胞总数相对少,不植活者相对多,造血重建速度较慢,对大体重儿童和成人进行CBT尚有问题。
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