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应根据筛选、确诊及特殊试验的顺序进行。
1.筛选试验(1)血管异常:出血时间(BT),毛细血管脆性试验。
(2)血小板异常:血小板计数,血块收缩试验,毛细血管脆性试验及BT.(3)凝血异常:凝血时间(CT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT),凝血酶原消耗时间(PCT),凝血酶时间(TT)等。
2.确诊试验(1)血管异常:毛细血管镜,血vWF、内皮素-1(ET-1)及TM测定等。
(2)血小板异常:血小板数量、形态,平均体积,血小板黏附、聚集功能,PF3有效性测定,网织血小板、血小板α颗粒膜蛋白(P选择素)、直接血小板抗原(GPⅡb/Ⅲa和Ⅰb/Ⅸ)单克隆抗体固相( MAIPA)检测及血栓烷B2测定等。
(3)凝血异常:1)凝血第一阶段:测定FⅫ、Ⅺ、X、Ⅸ、Ⅷ、Ⅶ、V及TF等抗原及活性。
2)凝血第二阶段:凝血酶原抗原及活性,凝血酶原碎片1+2(F1+2)测定。
3)凝血第三阶段:纤维蛋白原、异常纤维蛋白原、纤维蛋白单体、血(尿)纤维蛋白肽A (FPA)、FⅫ抗原及活性测定等。
(4)抗凝异常:①AT抗原及活性或凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)测定;②PC、PS及TM测定;③FⅧ:C抗体测定;④狼疮抗凝物或心磷脂类抗体测定。
(5)纤溶异常:①鱼精蛋白副凝(3P)试验;②血、尿FDP测定;③D-二聚体测定;④纤溶酶原测定;⑤t-PA、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)及纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PIC)等测定。
某些特殊、少见的出血性疾病,可能还需要进行一些特殊检查,始能确定诊断。如蛋白质结构分析、氨基酸测序及免疫病理学检查等。近年来,分子生物学研究在出血性疾病的诊断上取得了巨大进展,许多遗传性出血性疾病具有基因的异常改变,如血友病A的FⅧ、血友病B的FⅨ、血管性血友病的vWF、血小板无力症的GPⅡb-Ⅲa等,基因检测将成为遗传性出血性疾病的重要诊断手段。目前,限制性片断长度多态性(RFLPs)与可变数目串联重复序列(VNTR)分析等基因多态性检测已经用于血友病A、血友病B的间接诊断,并可检出携带者,用于产前诊断和遗传咨询。
一些常用的出、凝血试验在出血性疾病诊断中的意义。
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