流行性感冒病毒检查法

流行性感冒病毒检查法

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在流行期结合临床症状诊断流感并不困难,但要确诊或流行监测时必须进行
实验室检查,主要包括病毒分离培养、血清学诊断和快速诊断方法。
病毒的分离与鉴定
通常采取发病3 日内患者的咽洗液或咽拭子,经抗生素处理后接种于9 ~11
日龄鸡胚羊膜腔和尿囊腔中,于33℃~35℃孵育3 ~4 天后,收集羊水和尿囊液
进行血凝试验。如血凝试验阳性,再用已知免疫血清进行血凝抑制(hemoagglutination
inhibition,HI)试验,鉴定型别。若血凝试验阴性,则用鸡胚再盲目传代3 次,
仍不能出现血凝则判断病毒分离为阴性。也可用组织培养细胞(如人胚肾或猴肾)
分离病毒,判定有无病毒增殖可用红细胞吸附方法或荧光抗体方法。
血清学诊断
采取患者急性期(发病5 天内)和恢复期(病程2 ~4 周)双份血清,常用
HI试验检测抗体。如果恢复期比急性期血清抗体效价升高4 倍以上,即可做出诊
断。正常人血清中常含有非特异性抑制物,因此在进行HI试验前可用胰蛋白酶等
处理血清,以免影响HI试验结果。HI试验所用的病毒应当是与当前流行密切相关
的病毒株,反应结果才能确切。补体结合试验(compliment fixation ,CF)只
能检测NP、MP的抗体。这些抗体出现早、消失快。因此,CF试验只能作为是否新
近感染的指标。
快速诊断
对患者进行快速诊断,主要是采用间接或直接免疫荧光法、ELISA 法检测病
毒抗原。常取患者鼻甲粘膜印片或呼吸道脱落上皮细胞涂片,用荧光素标记的流
感病毒免疫血清进行免疫荧光染色检查抗原,或用ELISA 检查患者咽漱液中的抗
原。用单克隆抗体经免疫酶标法仅用24~72小时即可快速检测甲、乙型流感病毒
在感染细胞内的病毒颗粒或病毒相关抗原。
PCR 、核酸杂交或序列分析等方法也被用于检测流感病毒核酸或进行分型…
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